现代生化实验技术研究生期末考试复习题答案

以简答体型总结了14个常考的生化实验技术方面的考题。

1、 2012年现代生化复习题 1、简述天平的种类、电子天平的使用方法及注意事项

种类:台秤 (感量1000mg,称实验动物体重); 托盘天平(感量100mg,粗称固体试剂);

电子天平(感量1mg, 0.1mg,0.01mg 称固体试剂); 电光天平

电子天平使用方法:

①核实天平是否处于水平状态; ②开机预热; ③取称量纸一张,对折后方天平称量台上;

④按去皿键,使天平显示值为0.00g; ⑤轻轻叩打试剂瓶,徐徐倒入试剂;

⑥取除过量的试剂弃掉; ⑦ 关闭电源; ⑧清理称量台及天平周围

注意事项:

①将天平置于稳定的工作台上避免振动、气流及阳光照射。 ②在使用前调整水平仪气泡至中间位置。 ③按说明书的要求进行预热。

④称量易挥发和具有腐蚀性的物品时,要盛放在密闭的容器中,以免腐蚀和损坏电子天平。

⑤经常对电子天平进行自校或定期外校,保证其处于最佳状态。 ⑥若电子天平出现故障应及时检修。 ⑦ 不可过载使用以免损坏天平。 ⑧若长期不用,应暂时收藏为好

2、 2、简述微量移液器的使用及注意事项

使用:

(1)(1)设定容量 :调节体积至所需的刻度。(不允许超出额定范围调整)

(2)(2)吸液: ① 接上Tip头。连续按压数次,以调节空气。 ②按下控制钮至第一档;

③将吸嘴垂直进入液面下 1-6mm (视移液器容量大小而定); ④反复吸排液体 3 次。

⑤使控制钮缓慢滑回原位;⑥移液器移出液面前略等待 1-3 秒;缓慢取出吸嘴,确保吸嘴外壁无液体

(3)排液: ①Tip头贴住容器内壁 ; ②平稳地把按钮压至第一停点,1秒钟后再压至第二停点; ③将剩余液体排净;松开控制钮; ④然后按压弹射键弹射出吸嘴

(4)养护:①如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物;

②移液器使用完毕后,把移液器量程调至最上线,垂直放置在移液器架上;

③据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用 60 %的异丙醇消毒,再用双蒸水清洗并晾干; ④避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准;发现问题及时找专业人员处理

注意事项:

①垂直吸液、慢吸慢放; ②选择合适的量程范围,不能超过量程使用;

③选择与移液器匹配的枪头,安装枪头时不要用力太猛; ④移液器每日用完后,应旋到最大刻度。 ⑤当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞; ⑥需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理

3、 3、分光光度技术的理论依据是什么?如何用分光光度法测定被测物质的浓度? 理论依据是光吸收基本定律——Lambert-Beer定律

当一束单色光通过溶液时,一部分被吸收,一部分则透过溶液。

设入射光强度为I0,透射光强度为I,透光度:T= I / I o

透光度的负对数称为吸光度(A)或光密度(O.D.),表示为A= -lgT。

吸光度与溶液的浓度成正比,与光束通过溶液的距离(即光程)成正比。

利用特定波长的单色光(通常用最大吸收波长的入射光)照射不同浓度的某一溶液时,所得的吸光度大小应与溶液浓度呈线性关系,故可利用该线性关系通过计算或查标准曲线来求得未知溶液的浓度。

4、 4、简述分光光度计的使用及注意事项

使用:1、预热;比色杯倒入待测样品。 2、调节波长 3、开盖“T”位,调“0”旋钮。

4、关盖“A”位,调“100”旋钮 5、测定:拉动拉杆使被测样品依次进入光路,则显示器上依次显示样品的吸光度值。

注意事项:

1、1、为了防止光电管疲劳,不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。

2、比色皿的使用方法:

(1)拿比色皿时,手指只能捏毛玻璃面。

(2)装溶液至比色皿的2/3处,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,再用镜头纸擦拭。

(3)凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。

(4) 比色皿在使用后,应立即用水冲洗干净。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿

(5)测定一系列溶液的吸光度时,通常按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。

(6)不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;

3、一般把溶液浓度尽量控制在吸光度值0.1-0.7的范围内进行测定,所测得的读数误差较小。

4、仪器连续使用时间不应超过2 h,每次使用后需要间歇半小时以上才能再用。

5、每套分光光度计上的比色杯及比色杯槽不得随意更换。

6、分光光度计内放有硅胶干燥袋,需定期更换

5、 5、简述离心机的种类、使用及注意事项

种类:①低速离心机:<10×103 r/min ②高速离心机:10×103—25×103 r/min) ③超速离心机:>30×103r

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